siRNA沉默β-Catenin对肝星状细胞增殖和凋亡的影响*
葛文松,吴建新,陈颖伟,范建高
2011, 14(2):
91-94.
doi:10.3969/j.issn.1672-5069.2011.02.002
摘要
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多维度评价
目的 研究siRNA干扰β-Catenin表达,阻断Wnt/β-Catenin信号通路对肝星状细胞(HSC)增殖和凋亡的影响。方法 将化学合成的siRNA β-Catenin以Lipofectamine包裹,转染HSC-T6细胞,设阴性对照和空白对照;采用逆转录-聚合酶链反应和Western blotting检测细胞β-Catenin表达;采用Western blotting法检测细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达;采用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞凋亡。结果 以不同浓度的β-Catenin SiRNA转染HSC-T6细胞后,β-Catenin mRNA水平比阴性对照组分别下调了51.3±3.6%、85.7±6.8%和94.5±7.5%(P均<0.01),比空白对照组分别下调了50.5±3.4%、86.1±6.2%和93.7±7.2%(P均<0.01);β-Catenin蛋白表达被抑制了56.43±2.88%(P<0.01);Ⅰ和Ⅲ型胶原表达分别被抑制了46.58±3.46%(P<0.01)和50.48±3.72%(P<0.01);细胞增殖明显被抑制,最大抑制率达到44.8±2.8%(P<0.01);细胞凋亡增加达28.6%(P<0.05)。结论 siRNA β-Catenin能高效抑制HSC-T6细胞β-Catenin表达,阻断Wnt/β-Catenin信号通路,从而抑制HSC-T6细胞增殖,促进凋亡,显著减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成和分泌,具有预防及治疗肝纤维化的潜力。