目的 p65作为NF-κB家族重要的转录因子,在肝细胞癌进展过程中发挥着重要作用。本研究旨在探索p65对HepG2细胞脂代谢调控的影响。方法 应用数据库分析p65表达与HCC患者预后的关系。采用ChIP-seq和RNA-seq技术,采用生物信息学分析探究HepG2细胞p65 DNA结合谱,使用流式细胞术检测p65对HepG2细胞增殖的影响。采用实时定量PCR法(qRT-PCR)和免疫印记(Western blot,WB)法验证p65对脂代谢途径关键基因及其蛋白表达的影响,采用流式细胞术和共聚焦显微镜检测p65对HepG2细胞脂代谢的影响。结果 对UCSC Xena和GEPIA数据库分析显示,HCC癌组织p65常呈高表达,并与不良预后相关;与对照组比,敲低p65抑制HepG2细胞增殖,而过表达p65则促进HepG2细胞增殖;对ChIP-seq和RNA-seq数据综合分析共得到了205个共同基因,且富集在代谢途径中的基因最多,其中脂代谢相关关键基因包括ACSM2A、ACSM2B、ACSM3、ACSM5和HMGCS2等;p65敲低后ACSM5和HMGCS2 mRNA及其蛋白表达均显著降低,而p65过表达后ACSM5和HMGCS2 mRNA及其蛋白表达均显著升高;p65敲低能促进HepG2细胞脂质积累,而p65过表达则抑制HepG2细胞脂质的积累。结论 p65通过上调ACSM5和HMGCS2表达调控脂质代谢,促进HepG2细胞增殖。这一发现为揭示p65调控肝细胞癌细胞脂质代谢的机制提供了研究线索。

目的 探讨采用高敏HBV DNA检测技术在低病毒血症(LLV)慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒治疗疗效监测中的应用价值。方法 2019年1月～2022年12月我院诊治的200例CHB患者,纳入患者均接受恩替卡韦(ETV)治疗48 w或以上,对获得完全病毒学应答(CVR)患者继续口服ETV治疗,对未获得CVR患者,均改为富马酸丙酚替诺福韦(TAF)治疗,观察48周。分别采用实时荧光定量PCR(qPCR)和高荧光质量PCR(fq-PCR)法检测血清HBV DNA载量。 结果 在200例经ETV治疗48 w的CHB患者,经fq-PCR检测发现CVR者145例(72.5%),血清HBV DNA载量＞2000 IU/mL(PR)者13例(6.5%),血清HBV DNA载量在21～2000 IU/mL(LLV)者42例(21.0%); 在TAF继续治疗48 w末,经qPCR检测发现PR组获得CVR者13例(100.0%),而经fq-PCR检测发现只有5例(38.5%,P＜0.05),LLV组则分别为41例(97.6%)和30例(71.4%,P＜0.05),fq-PCR检测两组CVR比较,差异具有统计学意义(x²=4.662,P＜0.05);PR组和LLV组血清AST和ALT水平均正常,无统计学差异(P>0.05),而LLV组血清HBV DNA载量为(125.6±114.2)IU/mL,显著低于PR组【(370.4±217.8)IU/mL,P＜0.05】。 结论 采用高敏PCR检测技术可以帮助发现接受抗病毒治疗而处于LLV状态的CHB患者,以帮助临床做出治疗决策,其临床意义还有待于进一步观察。

目的 评估HBV感染孕妇在孕期接受核苷酸类抗病毒治疗阻断母婴传播的有效性和安全性。方法 2021年7月～2022年8月首都医科大学附属北京佑安医院诊治的112例HBeAg阳性HBV携带孕妇,于孕26～28周开始口服富马酸丙酚替诺福韦(TAF,n=57)或替诺福韦二吡呋酯(TDF,n=55)阻断治疗,至分娩后停用。常规给予新生儿预防接种,记录孕妇妊娠并发症,于新生儿出生后7～9月龄时检测血清HBV标记物和HBV DNA载量。结果 分娩前,TAF阻断组早产、妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)、妊娠期高血压病(HDCP)、胎膜早破(PROM)、羊水少和羊水过少发生率分别为7.0%、8.8%、7.0%、12.3%、7.0%和3.5%,与TDF阻断组的5.5%、9.1%、5.5%、10.9%、3.6%和0.0%比,差异无统计学意义(均P>0.05);TAF组血清ALP水平为(146.1±44.3)U/L,显著低于TDF组【(166.9±52.5)U/L,P＜0.05】;TAF组尿蛋白(uPRO)阳性率为7.0%,显著低于TDF组的23.6%(P＜0.05);两组血清ALT、AST、TBIL、sCr、P、Ca和肾小球滤过率(GFR)比较,差异无统计学意义(P>0.05);TAF组血清HBV DNA载量为(3.4±0.7)lg IU/ml,显著高于TDF组【(2.9±0.8)lg IU/ml,P＜0.05】;两组新生儿均未发生母婴传播。结论 对于HBeAg阳性HBV携带孕妇,在孕期应用TAF行抗病毒阻断治疗,阻断效果好,对肾功能的影响更小。